Rabies Viren

Rabies Viren (RABV) besitzen die Fähigkeit, sich in einem neuronalen Netzwerk retrograd über den synaptischen Spalt  auszubreiten. Dies ermöglicht die Identifizierung von Neuronen, die prä-synaptisch mit der ersten infizierten Zelle (Starter-cell) verbunden sind. Wir benutzen den auch für Tollwut Impfungen eingesetzten nicht-pathogene Stamm SAD-B19.

Das RABV besitzt ein einzelsträngiges RNA Genom negativer Polarität von ca. 12 kb. In der cDNA des SAD-B19 Stammes wurde das Glykoproteingen vollständig entfernt (G-deleted). Da ein transsynaptischer Transfer nur in Anwesenheit des G-Protein möglich ist, muss es in Trans bereit gestellt werden (durch erste Injektion mit AAVs, LVs, oder durch transgene G-Protein-expremierende Tiere). Anstelle des G Proteins können im Genom des RABV andere Proteine, wie z.B. eGFP, exprimiert werden.

Noch größere Sicherheit erlangt das RABV durch die Pseudotypisierung mit den Hüllproteinen EnvA und EnvB des Avian Sarcoma and Leukosis Virus (ASLV).  Die Infektiösität dieser Viren ist auf Zellen beschränkt, die einen in humanen Zellen nicht vorkommenden TVA bzw. TVB Rezeptor tragen. Somit muss für eine Infektion und anschließendem Transsynaptischen Transfer zunächst der Rezeptor und das G Protein bereitgestellt werden. In der unteren Abbildung sind die wesentlichen Schritte beschreiben (modifiziert von Wickersham et al. 2007).